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高效sgRNA純化試劑盒 T7體外轉錄

  • 型   號:91614
  • 價   格:
  • 更新時間:2025-04-23
  • 廠家性質:經銷商

本試劑盒是一款快速可靠的 sgRNA 專用的純化試劑盒,可體外轉錄(IVT)酶促反應中純化多達 200 μg 濃縮的高質量 RNA。du特設計的微量 sgRNA 純化柱,可確保零緩沖液殘留,無交叉污染,洗脫體積低至 6μl。
高效sgRNA純化試劑盒 T7體外轉錄

FlashPure sgRNA Purification Kit

高效 sgRNA 純化試劑盒


高效sgRNA純化試劑盒 T7體外轉錄

目錄號:91614

產品內容

產品組成

91614-25 (25 次)

91614-50 (50 次)

Buffer MRC

5 ml

10 ml

Wash Solution 1

6 ml

12 ml

Wash Solution 2/3

5 ml

10 ml

RNase-Free H2O

5 ml

10 ml

sgRNA Spin Column With Collection Tubes

25 套

50 套

自備試劑

無水乙醇

保存條件

室溫(15 ~ 25℃)

產品簡介

本試劑盒是一款快速可靠的 sgRNA 專用的純化試劑盒,可體外轉錄(IVT)酶促反應中純化多達 200 μg 濃縮的高質量 RNA。du特設計的微量 sgRNA 純化柱,可確保零緩沖液殘留,無交叉污染,洗脫體積低至 6μl。

在高鹽條件下,RNA 與硅膠吸附膜高效、專一地結合,經過漂洗步驟,最后 RNA 被 RNase-Free H2O洗脫下來,最大限度地去除了不需要的 NTP、蛋白質、無機鹽離子和許多有機雜質等,確保在 IVT/RNA 合成反應后獲得高純度的 RNA 轉錄本。洗脫后的 RNA 可用于多種下游應用,包括 RT-PCR、NGS、RNA 文庫制備、Northern blot、Formation of ribonucleoprotein (RNP) complexes for genome editing、顯微注射、RNA標記、 RNA 干擾、轉染等下游實驗。

本試劑盒不但可以純化 miRNA 等各種小的 RNA,也可以純化大片段的 mRNA 等 RNA。還適用于從酶反應液(如 DNase 處理、體外轉錄、RNA 加帽、蛋白酶處理、RNA 標記等)中純化回收 RNA,也可用于

從其它方式提取獲得的 RNA 的純化。

適用范圍

適用于回收≥15nt 的單鏈 RNA 或者雙鏈 RNA。

產品特點

1. 快速:步驟少,操作簡便,整個操作僅需 15 分鐘。

2. 高效:du特配方使本產品比一般試劑盒回收效率大大提高,并且不會抑制下游反應。

注意事項

1. 使用前請檢查 Buffer MRC 是否出現渾濁,如有混濁現象,可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,即可恢復澄清。

2. 所有步驟均可以在室溫進行,但是應該迅速操作,減少 RNA 降解機會。

3. Wash Solution 1 和 Wash Solution 2/3 加入無水乙醇后,可以在常溫保存。

4. Wash Solution 2/3 可能加入乙醇使用幾天后出現沉淀晶體,并不影響使用,不吸晶體,直接吸上清使用就可以。

操作步驟

提示:

第一次使用前請先在 Wash Solution 1 瓶和 Wash Solution 2/3 瓶中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標簽,并打對勾標記。

1. 于冰上,用 RNase-Free H2O 將 RNA 樣品補足至 100 μl,加入 200 μl Buffer MRC,輕柔混勻。

2. 加入 375 μl (1.25 倍體積)無水乙醇,混勻,無需離心。

注意:如果希望回收大于 25nt 的 RNA,加 1.25 倍體積無水乙醇就可以;

如果希望回收大于 15nt 的 RNA,可以加 2 倍體積無水乙醇。

3. 將上一步所得溶液加入一套吸附柱中(吸附柱套在收集管內),13,000 rpm 離心 30 sec,棄濾液,將吸附柱重新套回收集管。(吸附柱的最大容量是 700 ul,溶液較多時,可分兩次進行)

4. 加入 700 μl Wash Solution 1(請先檢查是否已加入無水乙醇!),13,000 rpm 離心 30 sec,棄濾液。

5. 漂洗:加入 500ul Wash Solution 2/3,13,000 rpm 離心 30 sec,棄濾液。

6. 二次漂洗:重復步驟 5 一次。

7. 干燥:將離心吸附柱于 13,000 rpm 離心 2 min,甩干殘留漂洗液。

8. 洗脫:將吸附柱置于一個新的 1.5 ml 離心管中,在吸附膜的中央懸空滴加 10 ~ 20 μl RNase-Free H2O,室溫放置 2 min,13,000 rpm 離心 1 min,收集 RNA 片段。

注意:為增加回收效率,可將 RNase-Free H2O 在 80℃預熱,也可將得到的溶液重新加入到離心管中,室溫放置 2 min,再次離心收集。

減少洗脫液(RNase-Free H2O)的體積可以提高 RNA 濃度,但是zui低洗脫液體積不應少于 6μl。

高效sgRNA純化試劑盒 T7體外轉錄

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