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SYBR Green I(10000×)電泳用 NobleRyder D0028

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  • 更新時(shí)間:2024-08-28
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北京諾博萊德科技有限公司供應(yīng)SYBR Green I(10000×)電泳用 NobleRyder D0028量大優(yōu)惠,咨詢 :

  SYBR Green I(10000×)電泳用 NobleRyder D0028

 

 

 

 

 

 

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SYBR Green I(10000×)電泳用

SYBR Green I是高靈敏的DNA熒光染料,適用于各種電泳分析,操作簡(jiǎn)單:無(wú)須脫色或沖洗。至少可檢出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。SYBR Green I dsDNA結(jié)合熒光信號(hào)會(huì)增強(qiáng)800-1000倍,用SYBR Green I染色的凝膠樣品熒光信號(hào)強(qiáng),背景信號(hào)低。可適用于多種電泳分析。

SYBR Green I適合于多種凝膠電泳方法:瓊脂糖凝膠,聚丙烯酰胺凝膠電泳,脈沖電場(chǎng)凝膠電泳,和毛細(xì)管電泳等。

SYBR Green I與雙鏈DNA的親和力非常高,因此可以用做電泳前染色,對(duì)分子生物學(xué)中常用的酶(如:Taq酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等)沒(méi)有抑制作用。另外,SYBR Green IEB相比,誘變能力大大降低。

SYBR Green I核酸染料特點(diǎn)

高靈敏:至少可檢出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。

信噪比高:樣品熒光信號(hào)強(qiáng),背景信號(hào)低。

操作簡(jiǎn)單:無(wú)須脫色或沖洗。

適用范圍廣:可適用于多種電泳分析。

使用方便:不影響其它修飾酶作用。

安全性高:分子克隆上明確誘變能力很低

使用方法

SYBR Green I預(yù)染方法

1.       該方法適于瓊脂糖凝膠電泳和PAGE凝膠電泳

2.       工作液的配制:用電泳緩沖液將10000×的SYBR GreenⅠ稀釋100倍,即為SYBR GreenⅠ工作液。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8冷藏一個(gè)月以上。

3.       制膠:按常規(guī)方法制膠,不含任何染料。

4.       樣品染色:向分析樣品中加入SYBR GreenⅠ工作液和載樣緩沖液,室溫放置10分鐘,使SYBR GreenⅠ與樣品中DNA充分結(jié)合。SYBR GreenⅠ工作液加入量為總上樣量的1/10

5.       DNA Marker染色:將5μL DNA Marker1μLSYBR GreenⅠ工作液混勻,室溫放置5分鐘,使SYBR GreenⅠ與DNA充分結(jié)合。(商品Marker稀釋2-5倍后再電泳,否則電泳條帶會(huì)變形,特別是大片段。)

6.       上樣、電泳:按常規(guī)操作。

SYBR Green I后染方法

1.       按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

2.       PH=7.0-8.5的緩沖液(如:TAETBETE),按照100001的比例稀釋SYBR GreenⅠ濃縮液,混勻,制成染色溶液。

3.       將染色溶液倒入合適的聚丙烯容器中,放入凝膠,用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10-30分鐘,染色時(shí)間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色,將配好的工作溶液輕輕地倒在膠板上,讓工作液均勻地覆蓋整個(gè)膠板,并染色30分鐘。玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過(guò)硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。

4.       用紫外儀觀測(cè)。

SYBR Green I使用注意事項(xiàng)

1.       "SYBR GreenⅠ預(yù)染色方法"中,電泳時(shí)間不要超過(guò)2小時(shí),否則SYBR GreenⅠ會(huì)從DNA上分離出來(lái),會(huì)產(chǎn)生彌散狀條帶。

2.       在常規(guī)用酒精沉淀核酸的過(guò)程中,SYBR Green I可以全部從雙鏈核酸上去掉。

3.       如果想對(duì)用 SYBR Green I 染過(guò)的膠進(jìn)行Southern blots,建議在預(yù)雜化和雜化溶液中加入0.1%- 0.3%SDS

4.       在紫外照射透視下,與雙鏈DNA接合的SYBR Green I呈現(xiàn)綠色熒光。如果膠中含有單鏈DNA則顏色為橘黃而不是綠色。

5.       SYBR Green對(duì)玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過(guò)程中用聚丙烯類容器。

 

北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū),是一家專業(yè)從事生化試劑、分子生物學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)耗材及實(shí)驗(yàn)儀器研發(fā)、銷售、服務(wù)為一體的生物科技公司,公司主要經(jīng)營(yíng)的進(jìn)口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, FermantasMBI, NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;產(chǎn)品涉及化工原料、生化試劑、分子克隆相關(guān)試劑、細(xì)胞培養(yǎng)及檢測(cè)常用試劑、實(shí)驗(yàn)室常用耗材及儀器。

SYBR Green I(10000×)電泳用 NobleRyder D0028

 

 

 

 

 

   

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